摘要:目的基于网络药理学研究栝楼桂枝汤治疗脑卒中后下肢痉挛的作用机制。方法利用TCMSP数据库、SwissTargetPrediction数据平台筛选栝楼桂枝汤活性成分靶点,并借助Gephi软件构建活性成分-靶点网络,运用Genecard、DisGeNET、TTD疾病数据库筛选作用于脑卒中、下肢痉挛靶基因,应用STRING平台构建靶蛋白相互作用网络,利用ClueGO软件对靶基因进行GO功能分析,通过DAVIDv6.8平台对关键靶点KEGG通路进行分析。结果栝楼桂枝汤中*酮类、有机酸类、皂苷类等成分作用于IL6、TNF、EGFR、ESR1、TP53、STAT3、F2等49个关键靶基因;参与横纹肌细胞增殖、骨重塑、平滑肌细胞增殖正调控、肌细胞增殖、内皮细胞增殖等14类生物过程;调控TNF、MAPK、PI3K-Akt、ALS、神经营养、5-羟色胺能神经突触等30条信号通路。结论栝楼桂枝汤多种活性成分通过抗炎、抗氧化、神经营养及保护等药理作用,以及参与肌细胞增殖等生物过程,从中枢神经系统及外周肌肉组织双向治疗脑卒中后下肢痉挛。
下肢痉挛是脑卒中的主要后遗症之一,典型表现为不对称性划圈步态,伴有反射亢进、肌肉痉挛、肌肉无力等,不仅患肢承重能力下降,关节活动范围缩小,躯体运动受限,还可造成疼痛、挛缩、畸形等并发症,严重影响患者生活质量。目前常用治疗方法包括康复训练、应用抗痉挛药物、局部神经化学阻滞、鞘内注射巴氯芬、外科手术等,这些方法虽有一定的治疗效果,但在有效性、安全性和经济性等方面都存在各自的缺陷[1]。
栝楼桂枝汤出自《金匮要略》,书中记载:“太阳病,其证备,身体强,几几然,脉反沉迟,此为痉,栝楼桂枝汤主之”,原方主要治疗太阳汗出恶风的柔痉,具有发散风寒、解肌舒筋之功效[2]。近年来研究[3-4]发现栝楼桂枝汤治疗脑卒中后下肢痉挛可显著改善患肢功能、提升患者生活自理能力,对康复训练起到易化作用,但其具体药效物质及作用机制并不清楚。许文等[5-6]应用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)法分析了栝楼桂枝汤血中移行成分,为研究栝楼桂枝汤治疗脑卒中后下肢痉挛奠定了物质基础。本研究应用网络药理学方法与技术,运用大数据分析、关联网络等手段探究栝楼桂枝汤血中移行成分作用靶点,通过基因本体(geneontology,GO)分析和通路富集等,尝试从宏观角度系统阐述释栝楼桂桂枝汤治疗脑卒中后下肢痉挛的科学内涵,为其临床应用提供参考证据。
1材料与方法
1.1栝楼桂枝汤入血成分及成分-靶点网络构建
本研究以栝楼桂枝汤血中移行成分为研究对象,运用TCMSP(